Offre de Stage 2021-2022 Master 2 ou équivalent école d’ingénieur (F/H)

Direction PSE-SANTE/SERAMED/Laboratoire de Radiobiologie des expositions Médicales (LRMed) Environnement Etude chez la souris de la réponse moléculaire descellules endothéliales vasculaires irradiées. La radiobiologie est l'étude des effetsbiologiques des rayonnements ionisants sur les êtres vivants. Une des missionsde l’IRSN est de développer des programmes de recherche afin de comprendre leseffets biologiques des rayonnements ionisants dans le cadre de leur utilisationdans le domaine médical et notamment la radiothérapie.A l’interface entre le sang et les organes, les cellules endothélialesvasculaires ont une fonction essentielle dans la réponse immuno-inflammatoire destissus lésés par l’irradiation, notamment par leur rôle de porte d’entrée descellules immunitaires. LeLaboratoire de Radiobiologie des expositions Médicales (LRMed) de l’IRSN aidentifié des acteurs clés de la réponse moléculaire des cellules endothélialesirradiées in vitro, et mis en évidence l’importance de la sénescenceendothéliale ainsi que l’hétérogénéité de la réponse transcriptionnelle à l’échellede la cellule unique en utilisant des approches de séquençage à haut débit surcellules uniques (scRNA-seq).En revanche, nous en savons beaucoup moins sur le rôle deces cellules à l’échelle de l’individu, alors qu’elles représentent une cible prometteusetant pour diminuer les effets secondaires de la radiothérapie que pour favoriserle contrôle tumoral par ce traitement. Mission Les approches qui associent l’isolement des cellules d’un organe par letri cellulaire à la cytométrie en flux et au scRNA-seq permettent d’étudier lesvariations des niveaux d’expression des gènes, des protéines ou encore desglycoconjugués à l’échelle d’une population de cellules ou de la celluleunique. Fort de l’expérience du laboratoire dans ces domaines, ce stageconsistera à prendre en main et parfaire la technique d’isolement des cellulesendothéliales à partir d’un intestin et/ou d’un poumon irradié de souris, deuxorganes qui peuvent être touchés lors de la radiothérapie. L’étudiant utiliserales techniques permettant de préparer des suspensions de cellules uniques pardigestion mécanique et enzymatique, l’enrichissement en cellules endothélialespar anticorps couplés à des billes magnétiques, la purification par FACS, etvérifiera la qualité de la purification par la cytométrie en flux à l’aide depanels d’anticorps validés au sein du laboratoire. A l’issu de cesenrichissements, des premières investigations seront réalisées afin d’évaluerles niveaux d’expression d’acteurs clés à l’échelle d’une population decellules endothéliales (niveau d’expression de gènes, activités enzymatiques)ou à l’échelle de la cellule endothéliale unique (niveau d’expression de sucresou de protéines par cytométrie en flux, niveau d’expression de gènes parscRNA-seq ). Profil Ce stage permettra à l’étudiant de mettre en œuvre une démarchescientifique et d’acquérir des connaissances théoriques et pratiques sur l’enrichissementde cellules par le tri, la cytométrie en flux, les techniques de biologie moléculaireset de biochimie courantes ainsi que la méthodologie de séquençage à haut débitsur cellule unique. Il est également prévu que ce travail se poursuive enprojet de thèse à la rentrée 2022. Présentation de l’IRSN L'IRSN, Etablissement Public à caractère Industriel et Commercial (EPIC) – dont les missions sont désormais définies par la Loi n° 2015-992 du 17 août 2015 relative à la transition énergétique pour la croissance verte (TECV) – est l'expert public national des risques nucléaires et radiologiques. L'IRSN concourt aux politiques publiques en matière de sûreté nucléaire et de protection de la santé et de l'environnement au regard des rayonnements ionisants. Organisme de recherche et d'expertise, il agit en concertation avec tous les acteurs concernés par ces politiques, tout en veillant à son indépendance de jugement. Type d'emploi : Stage